細胞鐵離子檢測試劑盒檢測原理

描述：
鐵是人體必需的元素之一，對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用，血液中鐵的含量不足，就會造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細胞內，各組織、器官包括各內分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內含量較為豐富。成人體內含鐵3～5克，大部分都以蛋白質復合物形式存在，極少部分以離子的形態(tài)存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子，線性范圍5~300uM。產品包括標準品和空白對照，本試劑盒可進行100個樣品的檢測。 

原理：
鐵與蛋白結合成復合物，在酸性介質中鐵從復合物中解離出來，再被還原劑還原成二價鐵，并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在540-580nm處可比色測定。

儲存
4℃保存，6個月有效。
適用范圍：
該試劑盒可用于培養(yǎng)細胞中鐵離子定量檢測。
用戶自備：
4.5%高錳酸鉀溶液5ml。

操作步驟：
1. 樣品準備（以24孔板為例）：
將含鐵元素DMEM培養(yǎng)過的細胞用冷的PBS 2ml洗兩遍，將PBS吸棄（若不馬上檢測可將其凍存于-20℃）。200ul/孔裂解液裂解細胞，置于搖床裂解2h。
2. 標準品的稀釋：用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標準品母液稀釋為：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設置0濃度對照反應管。
3. 將緩沖液與4.5%高錳酸鉀溶液按1:1混勻，稱為混液A。